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细胞培养解决方案 ——常规细胞培养
添加时间:2019-10-08
细胞培养试剂品牌:Gibco、HyClone、上海源培、Biological Industries、Enzo、WISENT、Cosmo Bio、ScienCell、Cellgro、Bionowa、天津灏洋、Caisson、LONZA、Stemcell等
(注:根据目前实验室使用情况,本专辑推荐试剂主要来自Gibco品牌,其他优秀品牌细胞培养产品请在站内搜索)
一. 平衡盐溶液
常用平衡盐溶液:
1. DPBS(Dulbecco’s磷酸盐缓冲盐溶液):不含碳酸氢钠
2. HBSS(Hank’s平衡盐溶液):含少量碳酸氢钠,约0.35mg/L
3. EBSS(Earle’s平衡盐溶液):含多量碳酸氢钠,约2.2mg/L
4. PBS(磷酸盐缓冲液):无钙、镁离子
二. 培养基
常用培养基类型:
1. MEM培养基:最小必需培养基,营养成分一般,适合广谱哺乳动物细胞单层生长
2. DMEM培养基:各成分加倍,分低糖(1000 mg/L)、高糖(4500 mg/L)、无糖,细胞生长快,为哺乳动物细胞培养提供卓越的质量、均一性和可控性
3. RPMI-1640:针对淋巴细胞培养设计,含BSS+21种氨基酸+11种维生素等,广泛应用于许多正常细胞和肿瘤细胞,也用于悬浮细胞培养
(注:L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的营养物质,其脱掉氨基后可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和核酸代谢。但L-谷氨酰胺在溶液中不稳定,高温会分解。酚红用于指示培养基pH值,研究表明,酚红可以模拟固醇类激素作用,尤其是雌激素,故为避免固醇类反应,可选择无酚红培养基。)
三. 血清
胎牛血清是目前实验室最常用细胞培养添加血清,其品质、性能和一致性是细胞培养能否成功的关键
四. 细胞冻存液
细胞冻存液用于细胞的冷冻保存。
Gibco®,Recovery™细胞培养冷冻培养基是一种完整的即用型冷冻培养基,用于冷冻在DMEM,DMEM / F-12,MEM,RPMI 1640和Ham's F-12中培养的大多数哺乳动物细胞,包括CHO-S,CHO- K1,HEK 293,Jurkat和NIH 3T3细胞等
五. 双抗(青霉素-链霉素)
抗生素青霉素和链霉素用于防止细菌培养物的细菌污染,它们对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌具有有效的联合作用
六. 支原体检测试剂盒
支原体污染使用传统的微生物技术很难检测到,但会影响细胞代谢,对实验结果产生不确定的影响。支原体检测试剂盒可以实现今早检测支原体污染事件,以防止下游污染或更多成本投入。
(注:根据目前实验室使用情况,本专辑推荐试剂主要来自Gibco品牌,其他优秀品牌细胞培养产品请在站内搜索)
一. 平衡盐溶液
常用平衡盐溶液:
1. DPBS(Dulbecco’s磷酸盐缓冲盐溶液):不含碳酸氢钠
品牌 | 货号 | 规格 | 说明 |
Gibco | 14287080 | 500 mL | 含钙、镁离子,含葡萄糖、丙酮酸 |
2. HBSS(Hank’s平衡盐溶液):含少量碳酸氢钠,约0.35mg/L
品牌 | 货号 | 规格 | 说明 |
Gibco | 14025092 | 500 mL | 含钙、镁离子,无酚红 |
3. EBSS(Earle’s平衡盐溶液):含多量碳酸氢钠,约2.2mg/L
品牌 | 货号 | 规格 | 说明 |
Gibco | 14155063 | 500 mL | 无钙、镁离子,无酚红 |
4. PBS(磷酸盐缓冲液):无钙、镁离子
品牌 | 货号 | 规格 | 说明 |
Gibco | 10010023 | 500 mL | pH 7.4 |
二. 培养基
常用培养基类型:
1. MEM培养基:最小必需培养基,营养成分一般,适合广谱哺乳动物细胞单层生长
品牌 | 货号 | 规格 | 说明 |
Gibco | 11095-080 | 500 mL | 含L-谷氨酰胺、酚红 |
2. DMEM培养基:各成分加倍,分低糖(1000 mg/L)、高糖(4500 mg/L)、无糖,细胞生长快,为哺乳动物细胞培养提供卓越的质量、均一性和可控性
品牌 | 货号 | 规格 | 说明 |
Gibco | 11965-092 | 500 mL | 高糖DMEM,含L-谷氨酰胺 |
3. RPMI-1640:针对淋巴细胞培养设计,含BSS+21种氨基酸+11种维生素等,广泛应用于许多正常细胞和肿瘤细胞,也用于悬浮细胞培养
品牌 | 货号 | 规格 | 说明 |
Gibco | 11875-093 | 500 mL | 含L-谷氨酰胺、酚红 |
(注:L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的营养物质,其脱掉氨基后可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和核酸代谢。但L-谷氨酰胺在溶液中不稳定,高温会分解。酚红用于指示培养基pH值,研究表明,酚红可以模拟固醇类激素作用,尤其是雌激素,故为避免固醇类反应,可选择无酚红培养基。)
三. 血清
胎牛血清是目前实验室最常用细胞培养添加血清,其品质、性能和一致性是细胞培养能否成功的关键
品牌 | 货号 | 规格 | 说明 |
Gibco | 10099141 | 500 mL |
安全胎牛血清; 来源澳大利亚; 内毒素水平≤10EU / ml; 血红蛋白水平:≤30mg / dl(通常≤25mg/ dl) |
四. 细胞冻存液
细胞冻存液用于细胞的冷冻保存。
Gibco®,Recovery™细胞培养冷冻培养基是一种完整的即用型冷冻培养基,用于冷冻在DMEM,DMEM / F-12,MEM,RPMI 1640和Ham's F-12中培养的大多数哺乳动物细胞,包括CHO-S,CHO- K1,HEK 293,Jurkat和NIH 3T3细胞等
品牌 | 货号 | 规格 | 说明 |
Gibco | 12648010 | 50 mL | 即用型冷冻培养基 |
五. 双抗(青霉素-链霉素)
抗生素青霉素和链霉素用于防止细菌培养物的细菌污染,它们对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌具有有效的联合作用
品牌 | 货号 | 规格 | 说明 |
Gibco | 15140122 | 100 mL | 液体,100 X |
六. 支原体检测试剂盒
支原体污染使用传统的微生物技术很难检测到,但会影响细胞代谢,对实验结果产生不确定的影响。支原体检测试剂盒可以实现今早检测支原体污染事件,以防止下游污染或更多成本投入。
品牌 | 货号 | 规格 | 说明 |
Applied Biosystems | 4460626 | 100次反应 |
5小时内获得结果; 检测超过90种支原体物种 |